產品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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鴿副粘病毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒 |
Pigeon Paramyxovirus(PPMV)RTPCR |
YS-P014590 |
分類(lèi):PCR檢測試(shì)劑盒
儲存條(tiáo)件:-20℃避(bì)光保(bǎo)存,避(bì)免反(fǎn)復凍融(róng)。
運(yùn)輸:低溫,避光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī):一(yī)年
貨期(qī):現貨PCR試劑盒的(dí)有效(xiào)期一般(bān)為(wéi)1年(nián),這是指在適(shì)當的儲(chǔ)存(cún)溫度下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑一般(bān)要貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià),產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部分試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反復凍融。
u 閾(yù)值(Threshold)設定:將(jiāng)閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫的最高點(diǎn)。
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢(jiǎn)測結果應為(wéi)陽性,有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增期,Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於35;
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在一(yī)次實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足,否(fǒu)則該次(cì)實驗視(shì)為無效。
2.可疑:有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期,且(qiě)38≤Ct<40,此時(shí)樣本為(wéi)可疑樣(yàng)本(běn);對於(yú)可疑樣本(běn)建議復核一(yī)次(cì),若(ruò)復核結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增期,則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性(xìng),否(fǒu)則(zé)判定為(wéi)陰(yīn)性;
3. 陰(yīn)性(xìng):無指數(shù)擴增(zēng)期,Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染,試(shì)劑汙(wū)染(rǎn),樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假陽性結果(guǒ);
2. 試(shì)劑運輸,保(bǎo)存不當(dāng)或試劑配(pèi)製不(bù)準確引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能(néng)下(xià)降,可(kě)能會(huì)導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結(jié)果。
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng);
④靶(bǎ)基因的特異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
鴿副(fù)粘(nián)病毒PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其中(zhōng)引物(wù)與模(mó)板的(dí)正確(què)結合(hé)是關鍵。引物與模(mó)板的結(jié)合(hé)及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對原則的。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反應的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性,使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結合(復性)可(kě)以在較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度(dù)下進行(háng),結合(hé)的特異(yì)性大大增(zēng)加(jiā),被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片(piàn)段也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持(chí)很高的正確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇特異(yì)性和保守性(xìng)高(gāo)的靶基因區(qū),其特(tè)異(yì)性程(chéng)度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量是以指數(shù)方式(shì)增加的,能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待測模(mó)板(bǎn)擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞;在(zài)病毒的(dí)檢(jiǎn)測中,PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成單(dān)位);在細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快速(sù)
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶,一次性地(dì)將反應(yīng)液加好後,即在DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性-退火-延(yán)伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增產物一般(bān)用電(diàn)泳分析(xī),不一定要(yào)用(yòng)同(tóng)位素,無放射(shè)性汙染(rǎn),易(yì)推廣。
(4) 對標本(běn)的純度要求低(dī)
不(bù)需要(yào)分離(lí)病毒(dú)或(huò)細菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可(kě)作為擴增模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床標本如(rú)血液,體腔液(yè),洗(xǐ)嗽液,毛發(fā),細胞(bāo),活(huó)PCR技術概(gài)論(lùn)。
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