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PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱 | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨號 |
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中間普(pǔ)雷(léi)沃(wò)菌(jūn)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Prevotella intermediaPCR |
YS-P014631 |
分類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
儲存條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避免反復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫，避光。
有(yǒu)效期：一(yī)年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效期(qī)一般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在適當的儲存(cún)溫度下(xià)。核(hé)酸擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的(dí)試劑(jì)一般要貯存(cún)於-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
【結果分析(xī)條件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫設(shè)定在剛(gāng)好超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質控品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高點。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性質控品(pǐn)的檢測結果應為陽性(xìng)，有明顯的指數擴增期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需(xū)在一次(cì)實驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實(shí)驗視為無(wú)效。
【結果判斷】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可疑樣本(běn)；對(duì)於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議(yì)復(fù)核(hé)一次，若復核(hé)結果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽性，否則(zé)判定為陰性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環境汙染(rǎn)，試劑汙(wū)染，樣品交(jiāo)叉(chā)汙染會出現假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保存不(bù)當或試(shì)劑(jì)配製(zhì)不(bù)準確引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下降，可(kě)能(néng)會(huì)導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反應的特異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反應的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶基因(yīn)的特異(yì)性(xìng)與保守(shǒu)性。
中間普(pǔ)雷(léi)沃(wò)菌PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與模板的(dí)正確結合(hé)是關鍵。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)結合(hé)及引物鏈(liàn)的延伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對原則的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合成反應的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫性，使反(fǎn)應中模板(bǎn)與引物的結(jié)合(復性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫度下進行，結合(hé)的特(tè)異(yì)性(xìng)大大增加，被擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片段也就(jiù)能保持很(hěn)高的正確度(dù)。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異(yì)性(xìng)和保守(shǒu)性高(gāo)的靶(bǎ)基因區，其特異性程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增加(jiā)的，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起(qǐ)始待(dài)測模板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢出(chū)一個靶細(xì)胞；在病毒的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏度(dù)可達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位)；在細菌學中zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一次性地將反(fǎn)應液(yè)加好後(hòu)，即在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上進行變(biàn)性-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小時完(wán)成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物一(yī)般(bān)用電泳分析，不(bù)一(yī)定要用同位素，無(wú)放(fàng)射性汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度要求低(dī)
不需要分(fēn)離病毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接用臨床標本如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技(jì)術概論。
