產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑盒
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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羅斯(sī)河(hé)病毒(dú)PCR檢測試劑(jì)盒 |
Ross River Virus(RRV)RTPCR |
YS-P014691 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避免反復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期(qī)一般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指在適當的儲存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸(suān)擴增部分的試(shì)劑一般要(yào)貯存於-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試劑則貯存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫設(shè)定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性質控品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫的最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢測(cè)結(jié)果應為陽(yáng)性，有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求需在一(yī)次(cì)實驗中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否則(zé)該(gāi)次實驗視(shì)為無效(xiào)。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可疑：有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為可疑(yí)樣本；對於可(kě)疑樣本建議復(fù)核一次(cì)，若(ruò)復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數擴增期，則判(pàn)定為陽性(xìng)，否(fǒu)則判(pàn)定為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗結果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環境汙染，試劑汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉汙染會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試劑運輸(shū)，保(bǎo)存不當或(huò)試劑配製不準(zhǔn)確引起的(dí)試(shì)劑(jì)檢測效能下降(jiàng)，可(kě)能會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應的忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基(jī)因的特異性與保守性(xìng)。
羅斯(sī)河(hé)病毒(dú)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引物與(yǔ)模板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的結合(hé)及引物(wù)鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基配對原則的(dí)。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高(gāo)溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板與引物的結合(hé)(復(fù)性)可以在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度下進行，結合的(dí)特異性大大(dà)增(zēng)加，被擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也就能保(bǎo)持很高的正確(què)度。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇特(tè)異(yì)性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其(qí)特異(yì)性程度就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的生成量(liáng)是以指數方(fāng)式增加的(dí)，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始(shǐ)待測模板擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個細(xì)胞中檢(jiǎn)出一(yī)個靶細(xì)胞；在病(bìng)毒的檢測中(zhōng)，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位)；在(zài)細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次(cì)性地(dì)將反應液加好後(hòu)，即在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性-退火-延伸(shēn)反應，一般在(zài)2～4 小時完成擴(kuò)增(zēng)反應。擴增產(chǎn)物一(yī)般用電泳分析，不一定要(yào)用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放射性汙(wū)染，易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本的純(chún)度要(yào)求低(dī)
不需(xū)要(yào)分離(lí)病毒或細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可作為(wéi)擴增模板(bǎn)。可(kě)直接用臨床標本如血液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細(xì)胞，活PCR技術概(gài)論。
