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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨號 |
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輪(lún)狀病毒群PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
Rotavirus A ARTPCR |
YS-P014692 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
儲存條件：-20℃避光保存，避(bì)免反復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效期：一(yī)年
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期一般為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指在適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試劑(jì)一(yī)般要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測(cè)部分試劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結(jié)果(guǒ)分析條件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將閾值(zhí)綫設定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超過(guò)正常(cháng)陰(yīn)性質控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫的最(zuì)高點。
【質控標準】
2. 陽性質(zhì)控品的檢(jiǎn)測結(jié)果應(yīng)為陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期(qī)，Ct值應小於等(děng)於35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在一次實驗中(zhōng)同(tóng)時滿足，否(fǒu)則該次實(shí)驗視為(wéi)無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為可疑樣本；對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣本(běn)建議(yì)復(fù)核一次，若復(fù)核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則判(pàn)定為陽(yáng)性，否則判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的解釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙(wū)染(rǎn)，試劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保(bǎo)存不當或試劑(jì)配製不(bù)準確引起(qǐ)的試劑檢測效能(néng)下降，可能會(huì)導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反應(yīng)的忠實性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異性與保守(shǒu)性。
輪(lún)狀(zhuàng)病毒(dú)群PCR檢測試劑盒(hé)其(qí)中引物(wù)與模(mó)板的正(zhèng)確結合(hé)是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的結合及引(yǐn)物鏈的延(yán)伸(shēn)是遵循(xún)鹼基配對原則(zé)的(dí)。聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高溫(wēn)性，使反應中(zhōng)模(mó)板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以(yǐ)在較高(gāo)的溫度下進行(háng)，結(jié)合的(dí)特異性(xìng)大(dà)大增(zēng)加，被(bèi)擴增的靶基因(yīn)片(piàn)段也就(jiù)能(néng)保持很高(gāo)的正確(què)度。再通過選擇特異性(xìng)和(hé)保守性高(gāo)的(dí)靶基因區(qū)，其特異性程度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是(shì)以(yǐ)指數(shù)方式增加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起(qǐ)始待測模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出(chū)一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒(dú)的檢測中，PCR的(dí)靈敏度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位)；在細(xì)菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一次性(xìng)地將反應(yīng)液(yè)加好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上進行變(biàn)性(xìng)-退火-延伸(shēn)反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增反應。擴增產(chǎn)物一(yī)般用電(diàn)泳(yǒng)分析，不一定要用同(tóng)位素，無放(fàng)射性汙染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度(dù)要求低
不(bù)需要(yào)分離病毒(dú)或細菌(jūn)及培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品及總RNA均可作(zuò)為擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血液(yè)，體腔液，洗嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概(gài)論。
