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PCR檢測(cè)試劑盒
商品屬性
| 產(chǎn)品名稱 | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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旋(xuán)毛蟲PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé) |
Trichinella spiralisPCR |
YS-P014856 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免反復凍(dòng)融(róng)。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有效期(qī)：一年(nián)
貨期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒的有效期一般為1年(nián)，這(zhè)是指在(zài)適當(dāng)的儲(chǔ)存溫度(dù)下。核酸(suān)擴增部分的試劑一般(bān)要(yào)貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測部(bù)分試劑則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免反復(fù)凍融。
【結果分析條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫設定在剛好超過正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品擴增曲(qū)綫的最高點(diǎn)。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控品的(dí)檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為陽性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求需在一(yī)次實驗中同時(shí)滿(mǎn)足，否則(zé)該次實驗視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯的指(zhǐ)數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本；對(duì)於可(kě)疑樣(yàng)本建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次(cì)，若復(fù)核結果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽性，否則判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰性樣本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果的解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙染，試(shì)劑(jì)汙染，樣品交(jiāo)叉汙染會出現假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存(cún)不當(dāng)或試劑(jì)配(pèi)製不準確(què)引起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下(xià)降，可能會導(dǎo)致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
PCR反(fǎn)應的特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反應的忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基(jī)因的特異性與保(bǎo)守(shǒu)性。
旋毛蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒其中引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)正確(què)結合(hé)是關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的(dí)結合及引物鏈的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵循鹼基配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性(xìng)，使反應中(zhōng)模板與(yǔ)引物的結(jié)合(復性(xìng))可以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度下進行，結合的特異性(xìng)大大增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基因片段(duàn)也就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高的正確(què)度。再通過(guò)選擇特(tè)異性和(hé)保守性高的(dí)靶基(jī)因區，其特異性(xìng)程(chéng)度就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物的(dí)生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始待(dài)測(cè)模板擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細胞中檢出一(yī)個靶(bǎ)細胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢測中，PCR的靈敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中zui小檢出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次性地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴增液和水浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產物一(yī)般(bān)用電泳分(fēn)析(xī)，不一定要用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無(wú)放射性汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對標本的(dí)純度要求低
不需要分離病毒(dú)或(huò)細菌及培養細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可作為擴增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術概論。
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