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PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英文名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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雅氏瓦蟎(mǎn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒 |
Varroa jacobsoniPCR |
YS-P014901 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光保(bǎo)存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效期：一(yī)年
貨期：現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一般為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指在適當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增部(bù)分(fēn)的試劑一般要貯存(cún)於(yú)-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑(jì)則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反復凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定在剛好超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性質控品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最高點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果應(yīng)為陽性，有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增(zēng)期，Ct值應小於等於35；
3. 以上要求需在一次(cì)實驗中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則該次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於(yú)可疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復核一次，若復核結果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增期，則判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否則(zé)判定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定為陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境汙(wū)染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉汙染(rǎn)會出現假陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不當或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不準確引(yǐn)起的試劑檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導(dǎo)致出(chū)現假陰性結果。
PCR反應(yīng)的特異(yì)性(xìng)：
②鹼基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特異(yì)性(xìng)與保守(shǒu)性。
雅氏瓦蟎PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其中引物與模(mó)板的(dí)正(zhèng)確結合是關鍵(jiàn)。引物(wù)與模板的(dí)結合(hé)及引物鏈的延伸是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則的。聚(jù)合酶合(hé)成反應的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫性，使反(fǎn)應中模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結合(復(fù)性)可以(yǐ)在較高的(dí)溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行，結(jié)合的(dí)特異(yì)性(xìng)大大(dà)增加(jiā)，被擴增的(dí)靶基因片段(duàn)也就能保持很高的(dí)正(zhèng)確度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特異(yì)性和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區(qū)，其(qí)特異性(xìng)程(chéng)度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的(dí)生成量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方式增加的(dí)，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出一(yī)個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病(bìng)毒的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴鍋上(shàng)進行變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應(yīng)，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小時完成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析，不(bù)一定(dìng)要(yào)用同(tóng)位素，無(wú)放(fàng)射(shè)性汙(wū)染，易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求(qiú)低
不(bù)需要分離(lí)病毒(dú)或(huò)細(xì)菌及培養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴增模(mó)板。可直(zhí)接用(yòng)臨床標(biāo)本(běn)如(rú)血液，體(tǐ)腔液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技術概(gài)論(lùn)。
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