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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號 |
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狄(dí)斯(sī)瓦(wǎ)蟎(mǎn)PCR檢測試劑(jì)盒(hé) |
Varroa destructorPCR |
YS-P014900 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
儲存條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸：低溫，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的有效期(qī)一(yī)般為1年，這(zhè)是指在(zài)適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸擴增部(bù)分的(dí)試劑一(yī)般(bān)要貯存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免反復凍(dòng)融(róng)。
【結果分析(xī)條件設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定在剛(gāng)好超過(guò)正(zhèng)常陰性質(zhì)控(kòng)品擴增曲綫的(dí)最高點。
【質控標準】
2. 陽性質控品的檢測結果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期，Ct值應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求需在(zài)一(yī)次實驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足，否(fǒu)則(zé)該次(cì)實驗視(shì)為無(wú)效。
【結果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明顯的指數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本；對於(yú)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建議復(fù)核一(yī)次，若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，則判(pàn)定為(wéi)陽性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無指數擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢驗結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙(wū)染，試劑(jì)汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現假陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存(cún)不當或試劑(jì)配製不準(zhǔn)確(què)引起的試劑檢(jiǎn)測(cè)效能下降(jiàng)，可能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特異性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異(yì)性(xìng)與保守性。
狄(dí)斯瓦蟎PCR檢測試(shì)劑盒其(qí)中引(yǐn)物與模(mó)板的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關鍵。引物與模(mó)板的結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼基(jī)配對(duì)原則的。聚(jù)合酶合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性，使反應中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(hé)(復性(xìng))可以在(zài)較高的(dí)溫(wēn)度下進行(háng)，結(jié)合的特異(yì)性大(dà)大增加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶基因片段(duàn)也就(jiù)能保持很高的正(zhèng)確度。再通過(guò)選擇(zé)特異性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區，其特異性(xìng)程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的(dí)生成量是(shì)以指(zhǐ)數方式(shì)增(zēng)加的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞中(zhōng)檢出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒的檢測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次性地將反(fǎn)應液(yè)加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行變性-退火-延伸反應，一(yī)般在2～4 小時(shí)完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般用電泳分(fēn)析(xī)，不(bù)一定要(yào)用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無放(fàng)射(shè)性汙染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度要求(qiú)低
不需(xū)要分離(lí)病毒或細菌及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增模(mó)板。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血液，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽液，毛發，細胞，活PCR技術概論(lùn)。
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