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PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
商品屬性
| 產品名(míng)稱 | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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亞巴猴(hóu)腫瘤(liú)病(bìng)毒病(bìng)毒PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
Yaba Monkey Tumor Virus（YMTV）PCR |
YS-P014929 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
儲存(cún)條件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有效期：一(yī)年
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效期一般為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的儲存溫(wēn)度下。核酸(suān)擴增部分的(dí)試(shì)劑一(yī)般要貯存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分試劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反復(fù)凍融。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫設定(dìng)在剛好超過(guò)正常(cháng)陰性質(zhì)控品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的(dí)最高點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為陽性，有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期，Ct值應(yīng)小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在(zài)一(yī)次實驗中同時(shí)滿足(zú)，否則該次實(shí)驗視為無效。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯的指數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑(yí)樣本(běn)；對(duì)於可疑(yí)樣本(běn)建(jiàn)議復核一次，若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性，否則判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙染，試劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保存(cún)不當或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的(dí)試劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下(xià)降，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特異(yì)性與保(bǎo)守性。
亞巴(bā)猴腫瘤(liú)病(bìng)毒(dú)病(bìng)毒(dú)PCR檢測試劑盒(hé)其中(zhōng)引物(wù)與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板(bǎn)的結合及引(yǐn)物(wù)鏈的延伸是遵循鹼基配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反應的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫性(xìng)，使反應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結(jié)合(復性(xìng))可以在較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度下進行，結(jié)合(hé)的特異性大(dà)大增加，被擴增的靶(bǎ)基因片段(duàn)也就能保(bǎo)持(chí)很高的(dí)正(zhèng)確(què)度。再通過選(xuǎn)擇特異性(xìng)和(hé)保守性高的靶基(jī)因區，其特異性程(chéng)度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成量是以指數方式增(zēng)加的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞中檢出一個靶(bǎ)細胞；在病毒的檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌學中zui小檢出率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應用(yòng)耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應液加好後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴鍋上進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退火-延伸(shēn)反應(yīng)，一般(bān)在2～4 小時完成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用電泳分析(xī)，不一定要用同(tóng)位素(sù)，無(wú)放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易推廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要求低
不需要分離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可直(zhí)接用臨(lín)床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發，細胞，活PCR技術概論。
