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PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商品屬性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英(yīng)文名稱 | 貨(huò)號(hào) |
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黃(huáng)熱(rè)病(bìng)病(bìng)毒PCR檢測試劑盒(hé) |
Yellow Fever Virus(YFV)RTPCR |
YS-P014931 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避免(miǎn)反復凍融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一年
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期一般為1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下。核酸擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的試劑(jì)一般要貯存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測(cè)部分(fēn)試劑(jì)則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值綫設定在(zài)剛好超過正常(cháng)陰性質控品擴增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性質控品的檢(jiǎn)測(cè)結果應為陽性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct值(zhí)應小於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需(xū)在(zài)一(yī)次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同時滿足，否則該(gāi)次實驗視為無(wú)效(xiào)。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本；對(duì)於可疑樣本(běn)建議復核(hé)一次(cì)，若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則判定為陽(yáng)性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰性樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 實驗室環境汙染(rǎn)，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出現假陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存(cún)不(bù)當(dāng)或試(shì)劑配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的試劑檢測(cè)效能下降，可能會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假陰(yīn)性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反應的忠(zhōng)實性；
④靶基因的特(tè)異性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
黃熱(rè)病病毒PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)正確結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物(wù)與模板(bǎn)的結(jié)合及引(yǐn)物鏈的延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基配對(duì)原則(zé)的。聚合酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫(wēn)性，使反(fǎn)應中模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(復性(xìng))可以在較(jiào)高(gāo)的溫度下進行，結合的特(tè)異性大大增(zēng)加，被擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片段也就能保持很高(gāo)的正確(què)度。再通過選擇特(tè)異性和保守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區(qū)，其特異性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以(yǐ)指(zhǐ)數方式(shì)增加(jiā)的(dí)，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在病毒(dú)的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位)；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出率(shuài)為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地(dì)將反應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進行變性-退火-延(yán)伸(shēn)反應，一般在2～4 小時(shí)完成擴增反應。擴增產物(wù)一般(bān)用電泳分析(xī)，不一定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素，無放射(shè)性汙染，易推廣。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度要(yào)求低
不需要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及(jí)培養細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增模板(bǎn)。可直接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如血液(yè)，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽液，毛發，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概論。
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