產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
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阿(ā)留(liú)申(shēn)病毒PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒 |
50T |
YS-P014942 |
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件:-20℃避光保(bǎo)存,避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運輸:低(dī)溫(wēn),避光。
有效期:一年
貨(huò)期:現貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期(qī)一般(bān)為1年,這是指(zhǐ)在(zài)適當的儲存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核酸擴(kuò)增部分的試劑(jì)一般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下,產物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。

u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定:將(jiāng)閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛(gāng)好超過(guò)正常(cháng)陰(yīn)性質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽性(xìng)質控品的(dí)檢測結果應為陽(yáng)性,有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於35;
3. 以上要(yào)求(qiú)需在(zài)一(yī)次(cì)實驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足,否則(zé)該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無效。
2.可疑:有明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī),且38≤Ct<40,此時樣本為可疑樣本;對於(yú)可疑樣本建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次,若復(fù)核(hé)結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期(qī),則判定(dìng)為(wéi)陽性(xìng),否則判定為陰性;
3. 陰性(xìng):無指數擴增(zēng)期,Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境汙(wū)染,試劑(jì)汙染,樣品(pǐn)交叉汙染會出(chū)現(xiàn)假陽性(xìng)結(jié)果;
2. 試(shì)劑運輸,保(bǎo)存不當或(huò)試(shì)劑(jì)配製不準確(què)引(yǐn)起的試劑檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下降(jiàng),可能(néng)會導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)。

②鹼基配對原(yuán)則;
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性(xìng);
④靶基因(yīn)的(dí)特異性(xìng)與保守(shǒu)性。
阿(ā)留(liú)申(shēn)病毒(dú)PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與(yǔ)模板的正確結合(hé)是關鍵。引物與(yǔ)模板的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延伸是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫性,使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的(dí)結合(hé)(復性)可以在較高(gāo)的(dí)溫度下進行(háng),結合的特異性(xìng)大大(dà)增加,被(bèi)擴(kuò)增的靶基因(yīn)片(piàn)段也(yě)就能保持很(hěn)高的(dí)正確(què)度。再通過(guò)選擇(zé)特(tè)異性和(hé)保(bǎo)守性高的(dí)靶(bǎ)基因區(qū),其特異(yì)性程(chéng)度就更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增加的(dí),能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待測模板(bǎn)擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢(jiǎn)出一(yī)個靶細胞(bāo);在(zài)病(bìng)毒的檢測中(zhōng),PCR的靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空斑形成單位(wèi));在細菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快速
PCR反應用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶(méi),一次(cì)性(xìng)地將反應液(yè)加(jiā)好後,即在(zài)DNA擴(kuò)增液和水浴鍋(guō)上進(jìn)行變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應,一(yī)般(bān)在(zài)2~4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增(zēng)產物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析,不一(yī)定要(yào)用同(tóng)位素(sù),無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染,易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度(dù)要求低
不(bù)需(xū)要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細胞,DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可作為(wéi)擴增模(mó)板。可直(zhí)接用(yòng)臨床標(biāo)本如血(xiě)液,體(tǐ)腔液,洗嗽(sòu)液,毛發(fā),細(xì)胞,活PCR技(jì)術概論。
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