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產品(pǐn)中心
定(dìng)量PCR試(shì)劑盒
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格 | 貨號 |
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副豬(zhū)嗜血杆菌定量PCR檢測試劑盒 |
50T |
YS-P015035 |
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存，避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效期(qī)：一年
貨期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為1年(nián)，這是(shì)指在適(shì)當的儲存溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增(zēng)部分的試劑一般要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設(shè)定(dìng)在剛好(hǎo)超(chāo)過正常(cháng)陰性(xìng)質控(kòng)品擴增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果應為陽(yáng)性，有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在一(yī)次(cì)實驗中(zhōng)同時(shí)滿足，否則該次實驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可(kě)疑樣本(běn)；對於可疑樣本建議復(fù)核一(yī)次(cì)，若復核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，則(zé)判(pàn)定為陽性，否則判定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙染，樣品交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保存不當或試(shì)劑(jì)配(pèi)製不準(zhǔn)確引起的(dí)試劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能會導致(zhì)出現(xiàn)假陰性結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性；
④靶基因(yīn)的特異性與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
副豬嗜(shì)血(xiě)杆菌定量(liáng)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其中(zhōng)引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正確結(jié)合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引物鏈的延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反應的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性，使(shǐ)反應(yīng)中模板(bǎn)與(yǔ)引物的結合(復(fù)性)可(kě)以在較高的溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行(háng)，結合的特(tè)異性(xìng)大(dà)大(dà)增加，被擴增的(dí)靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段也就能保(bǎo)持(chí)很高(gāo)的正(zhèng)確(què)度。再(zài)通過(guò)選擇特(tè)異(yì)性和(hé)保(bǎo)守性高的靶(bǎ)基因區(qū)，其(qí)特異性程(chéng)度就更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是以指數(shù)方式(shì)增加的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始待測模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個靶(bǎ)細胞；在病毒(dú)的(dí)檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑形成單位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次(cì)性地將反應液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即在DNA擴增(zēng)液和水浴鍋上進行(háng)變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴增反(fǎn)應。擴增產物一般用電(diàn)泳(yǒng)分析，不(bù)一(yī)定要用(yòng)同(tóng)位素，無(wú)放射(shè)性(xìng)汙染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度(dù)要求(qiú)低(dī)
不需要(yào)分離病(bìng)毒或(huò)細菌(jūn)及培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴增模板(bǎn)。可直接用臨床標(biāo)本如血液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液(yè)，毛發，細胞，活PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
- 上一(yī)條(tiáo)：乙型(xíng)肝炎病(bìng)毒核酸(suān)定(dìng)量(liáng)及YMDD變異聯合PCR測定(dìng)試劑盒(hé)
- 下(xià)一(yī)條(tiáo)：肺炎支原(yuán)體熒光定(dìng)量PCR檢測試(shì)劑(jì)盒（染料(liào)法）
