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定(dìng)量(liáng)PCR試劑(jì)盒
乙(yǐ)型肝(gān)炎(yán)病毒核(hé)酸定量及YMDD變異聯合(hé)PCR測定(dìng)試劑(jì)盒(hé)
商品屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 規(guī)格(gé) | 貨(huò)號 |
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乙(yǐ)型(xíng)肝炎病毒核(hé)酸定(dìng)量及YMDD變(biàn)異聯合(hé)PCR測(cè)定試(shì)劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015298 |
儲存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫，避光。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨期：現貨PCR試(shì)劑盒的(dí)有效期一(yī)般(bān)為1年(nián)，這是指在適當(dāng)的儲存(cún)溫度(dù)下。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設定在(zài)剛好超(chāo)過正(zhèng)常陰性質控品擴(kuò)增曲(qū)綫的最(zuì)高點。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯的指數擴增期，Ct值(zhí)應小於等於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需在一次實(shí)驗中同時(shí)滿足，否則(zé)該(gāi)次實驗(yàn)視(shì)為無效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可疑(yí)樣本；對於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建議復核(hé)一(yī)次(cì)，若復(fù)核結果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期，則判定為陽性(xìng)，否則判定(dìng)為陰性；
3. 陰性：無指數擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染，試劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會出現(xiàn)假陽(yáng)性結果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當或試(shì)劑配製不(bù)準確引起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下(xià)降(jiàng)，可能(néng)會導致出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應(yīng)的特異性(xìng)：
②鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶(bǎ)基(jī)因的特異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性。
乙型(xíng)肝(gān)炎(yán)病毒核(hé)酸(suān)定(dìng)量及YMDD變異(yì)聯(lián)合(hé)PCR測定(dìng)試劑盒(hé)其中引物與模板(bǎn)的正確結(jié)合(hé)是關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的結合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則的。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫(wēn)性(xìng)，使反應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的(dí)結合(復(fù)性)可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行(háng)，結合(hé)的特(tè)異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加，被擴增(zēng)的靶基因片(piàn)段(duàn)也(yě)就能(néng)保持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度。再通過(guò)選擇特異性和保守(shǒu)性高(gāo)的靶基因(yīn)區，其特(tè)異性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量是以指數(shù)方(fāng)式(shì)增(zēng)加的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板擴增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次性地(dì)將反應液(yè)加好(hǎo)後，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產物一般用電(diàn)泳分(fēn)析，不(bù)一定要(yào)用同位素，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需要分離(lí)病毒或細菌(jūn)及培養(yǎng)細胞，DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增模板(bǎn)。可直(zhí)接用(yòng)臨床標(biāo)本(běn)如血液，體腔液(yè)，洗嗽液，毛發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概(gài)論(lùn)。
