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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
商(shāng)品屬性
| 產品名(míng)稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
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西(xī)尼羅河病(bìng)毒(dú)PCR檢測試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015271 |
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效期：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期(qī)一般為1年，這(zhè)是(shì)指在適(shì)當(dāng)的儲存溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴增(zēng)部(bù)分的試劑一般要貯(zhù)存於-20℃下，產物(wù)檢測部分試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果分(fēn)析條件(jiàn)設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值綫設定(dìng)在剛好超過正常(cháng)陰(yīn)性質控(kòng)品擴增(zēng)曲綫的最高點(diǎn)。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品(pǐn)的檢測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以上要求需(xū)在(zài)一次(cì)實驗中同時滿(mǎn)足，否(fǒu)則(zé)該次實驗(yàn)視為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可疑(yí)樣本；對於可疑樣本建(jiàn)議復核一次，若復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值均判定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環境汙染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染會(huì)出現假陽性(xìng)結果；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存不(bù)當或試(shì)劑配製不(bù)準確引(yǐn)起的試(shì)劑檢測效(xiào)能下降，可(kě)能會(huì)導致出現假(jiǎ)陰性結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特異性(xìng)：
②鹼基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成反應的忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基(jī)因的特(tè)異(yì)性與保(bǎo)守性(xìng)。
西(xī)尼(ní)羅(luó)河病(bìng)毒(dú)PCR檢測試劑盒(hé)其中引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)正確(què)結合是(shì)關鍵。引物與(yǔ)模板的結(jié)合及引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基(jī)配對原則(zé)的。聚合酶合(hé)成(chéng)反應的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫性(xìng)，使反應(yīng)中(zhōng)模板與引(yǐn)物(wù)的結合(復(fù)性)可以(yǐ)在(zài)較高的溫度下(xià)進行，結合的特異性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加，被擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就能保持很高的(dí)正確(què)度。再通過選擇特(tè)異性和保守性高的靶(bǎ)基因(yīn)區，其特異(yì)性程度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生(shēng)成量(liáng)是(shì)以指數方式增加(jiā)的，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個靶(bǎ)細(xì)胞；在病(bìng)毒的檢測(cè)中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形(xíng)成(chéng)單位(wèi))；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性地將反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進行變性(xìng)-退火-延伸反(fǎn)應，一(yī)般在2～4 小時(shí)完(wán)成擴(kuò)增反應。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一般用電泳分析，不一(yī)定要(yào)用(yòng)同位素，無放射性(xìng)汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要(yào)求(qiú)低
不需要(yào)分離病(bìng)毒或細(xì)菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增模板。可直接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細胞，活(huó)PCR技術(shù)概論(lùn)。
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