產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 規格 | 貨(huò)號(hào) |
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細小(xiǎo)病(bìng)毒B PCR檢測試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015272 |
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般為1年(nián)，這是指在適當(dāng)的儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下。核酸擴增部分的試劑一般要(yào)貯存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫設定在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質控品擴增曲(qū)綫的最高點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的(dí)檢測結果應為陽(yáng)性(xìng)，有明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應(yīng)小於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需在(zài)一次(cì)實驗中同時(shí)滿足，否(fǒu)則(zé)該次實(shí)驗(yàn)視為無效。
【結(jié)果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑樣(yàng)本；對(duì)於可(kě)疑樣本建(jiàn)議復核一次(cì)，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴(kuò)增(zēng)期，則判(pàn)定(dìng)為陽性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果的解釋(shì)】
1. 實驗室環境(jìng)汙(wū)染，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品交叉(chā)汙(wū)染會(huì)出現假(jiǎ)陽性結果；
2. 試劑(jì)運輸，保存(cún)不(bù)當(dāng)或(huò)試劑配(pèi)製不準確引起的試劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下(xià)降(jiàng)，可能會導致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應的忠實性；
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特異性與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
細(xì)小(xiǎo)病毒(dú)B PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)結合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是遵循鹼(jiǎn)基配對(duì)原則(zé)的。聚合酶(méi)合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶(méi)耐高(gāo)溫性(xìng)，使反應中(zhōng)模板(bǎn)與引物(wù)的結合(復性)可(kě)以(yǐ)在較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度下進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的特異(yì)性大(dà)大增加，被擴(kuò)增的靶基(jī)因(yīn)片段(duàn)也就能(néng)保持很高(gāo)的正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通(tōng)過選擇特(tè)異(yì)性和保守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其(qí)特異(yì)性程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生(shēng)成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指數方式(shì)增(zēng)加的(dí)，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始待(dài)測模(mó)板擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬個細胞中(zhōng)檢出一(yī)個靶細胞(bāo)；在病毒的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單(dān)位)；在(zài)細菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一(yī)次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液(yè)加好後(hòu)，即在DNA擴增液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上(shàng)進行變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反應，一般在(zài)2～4 小時(shí)完成擴增(zēng)反應。擴增產(chǎn)物一般(bān)用電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不一(yī)定(dìng)要用(yòng)同位素，無放射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純(chún)度要(yào)求低
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及培(péi)養細胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均可作(zuò)為擴增模板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用臨床標(biāo)本如(rú)血(xiě)液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
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