產(chǎn)品描(miáo)述：

特點：

1. 一(yī)管式(shì)操(cāo)作(zuò)，用(yòng)戶(hù)隻需要提供(gōng)樣品(pǐn)即可(kě)。

2. 根(gēn)據豬(zhū)Delta冠狀病毒熒光定量PCR試劑盒(hé)熱休克蛋白基因保(bǎo)守區域(yù)設計引物，能專(zhuān)一性檢(jiǎn)測出(chū)樣品(pǐn)中的豬(zhū)Delta冠(guān)狀(zhuàng)病毒(dú)熒光(guāng)定量(liáng)PCR試(shì)劑盒成分，但(dàn)不能檢測(cè)其(qí)他非(fēi)豬Delta冠狀病毒熒光(guāng)定(dìng)量(liáng)PCR試劑(jì)盒(hé)成(chéng)分。

3. 快速，整個(gè)檢測過(guò)程（按(àn)一(yī)個樣品計(jì)）所需時間(jiān)僅為 2.0 小時。

4. 隻需要(yào)普通(tōng) PCR 儀和凝膠電泳儀，無(wú)需配置貴(guì)重儀(yí)器設備。

5. 對(duì)混合樣品中豬(zhū)Delta冠(guān)狀(zhuàng)病毒熒光定量PCR試(shì)劑盒成分(fēn)的檢(jiǎn)測(cè)下限為(wéi) 0.1%，對樣品(pǐn)中(zhōng)豬(zhū)Delta冠(guān)狀病毒熒光(guāng)定量(liáng)PCR試(shì)劑盒(hé)成分(fēn)的核酸檢測下(xià)限(xiàn)為 1.0ng/μL。

6. 本隻能用於科(kē)研，足夠 50 次 40uL 體(tǐ)係(xì)的常(cháng)規(guī) PCR。

1）RT-PCR可(kě)以檢測組織，細胞，血(xiě)液(yè)，細菌等很(hěn)多(duō)材(cái)料，不同(tóng)的(dí)樣本(běn)有不同要(yào)求(qiú)，實驗前請(qǐng)充分溝(gōu)通確認實驗方案(àn)和(hé)樣本情況；

2）客(kè)戶盡可能(néng)提供實(shí)驗的(dí)背(bèi)景信息，物種，基因準(zhǔn)確(què)的名(míng)稱(chēng)和(hé)ID號；

3）客(kè)戶(hù)盡量(liáng)不要(yào)提供DNA或RNA樣品。

4）樣本保存(cún)於液(yè)氮(dàn)或幹冰(bīng)，也可以保(bǎo)存於(yú)Trizol液(yè)中。

實(shí)時(shí)熒光(guāng)定(dìng)量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指(zhǐ)在PCR反(fǎn)應(yīng)體係中(zhōng)加(jiā)入熒光基(jī)團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監測整個PCR進程，通過標準(zhǔn)曲綫對(duì)未(wèi)知(zhī)模板進行(háng)定(dìng)量分(fēn)析的方法。實時熒光(guāng)定(dìng)量(liáng)PCR的化(huà)學(xué)原理包括探(tàn)針類和非探針(zhēn)類兩類，探(tàn)針(zhēn)類(lèi)是利用(yòng)與靶細(xì)胞序列(liè)特異性雜交的(dí)探針(zhēn)來(lái)指示擴增產物(wù)的增加，非(fēi)探針類(lèi)是利(lì)用熒(yíng)光染料(liào)或者特(tè)異性(xìng)設計的引物(wù)來(lái)指示擴增的增(zēng)加。運用該技術可以對DNA，RNA樣品進行定量（包括*定(dìng)量和相對定量）和定性(xìng)分(fēn)析。

主要(yào)服(fú)務：DNA或RNA的(dí)*定(dìng)量(liáng)分析(xī)，基因(yīn)表達(dá)差異分(fēn)析(xī)，基(jī)因分型。

實(shí)驗方(fāng)法(fǎ)步(bù)驟：
豬(zhū)Delta冠狀病毒熒(yíng)光定(dìng)量(liáng)PCR試劑盒方法
1：在(zài)冰(bīng)浴中(zhōng)，按以下(xià)次(cì)序將各成分加入一無(wú)菌(jūn)0.5ml離(lí)心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引(yǐn)物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶(méi) （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加(jiā)ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不(bù)加或添(tiān)加(jiā)石(shí)蠟油。
2：調(tiáo)整好(hǎo)反(fǎn)應(yīng)程序。將上述混合液稍加離(lí)心(xīn)，立即置(zhì)PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性(xìng)3-5min，進入循環擴增階(jiē)段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循(xún)環(huán)30-35次(cì)，在72℃ 保溫7min。
3：結束(shù)反應(yīng)，PCR產物(wù)放置於4℃待電泳檢測(cè)或(huò)-20℃長期保存。
4：PCR的(dí)電泳(yǒng)檢測：如在反(fǎn)應管(guǎn)中加(jiā)有(yǒu)石蠟油，需(xū)用(yòng)100μl氯仿(fǎng)進行(háng)抽提反應混(hùn)合(hé)液，以除去(qù)石(shí)蠟(là)油；否則，直(zhí)接(jiē)取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟
典(diǎn)型(xíng)的PCR由（1）高(gāo)溫變性模板(bǎn)；（2）引物與模板(bǎn)退火；（3）引物沿模(mó)板延伸三(sān)步反(fǎn)應組(zǔ)成一(yī)個循環，通(tōng)過(guò)多次循環反應，使目的DNA得(dé)以(yǐ)迅速(sù)擴增。其主要步驟是(shì)：
將待擴(kuò)增(zēng)的模板DNA置高(gāo)溫下（通(tōng)常(cháng)為93℃-94℃）使(shǐ)其(qí)變性解成單鏈；
人工(gōng)合成(chéng)的(dí)兩個寡核(hé)苷酸引物(wù)在(zài)其合(hé)適(shì)的復性溫(wēn)度下分(fēn)別與(yǔ)目(mù)的基因(yīn)兩(liǎng)側的兩(liǎng)條單(dān)鏈互補結合，兩個引物在模(mó)板上結(jié)合的位置(zhì)決定(dìng)了擴增(zēng)片段的長短；
耐熱(rè)的(dí)DNA聚合(hé)酶(méi)（Taq酶）在(zài)72℃將(jiāng)單核苷酸(suān)從(cóng)引物(wù)的3’端(duān)開始摻入(rù)，以目的(dí)基(jī)因(yīn)為模(mó)板(bǎn)從(cóng)5’→3’方向(xiàng)延伸，合(hé)成DNA的新(xīn)互補鏈(liàn)。