產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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小隱孢子(zǐ)蟲PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
Cryptosporidium parvumPCR |
YS-P014072 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光保存，避免反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫，避光。
有(yǒu)效期：一(yī)年
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的有效期(qī)一般為1年，這是(shì)指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存溫度下。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑一般要貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反復凍融。
【結(jié)果分析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過正常陰性質控品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的檢(jiǎn)測結果應為(wéi)陽(yáng)性，有明(míng)顯的指數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以上要求需(xū)在一次(cì)實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿(mǎn)足，否則該(gāi)次實驗視為無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為可(kě)疑樣本；對(duì)於可(kě)疑樣本(běn)建(jiàn)議復核一次(cì)，若復核結果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期，則判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則(zé)判定為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定為陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對檢驗結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境汙染(rǎn)，試劑(jì)汙染，樣品交叉汙染會(huì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑運輸，保存(cún)不當或試(shì)劑配(pèi)製不準確引(yǐn)起的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能下(xià)降(jiàng)，可能會導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性(xìng)與(yǔ)保守性。
小隱孢子(zǐ)蟲PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)其中引物與模(mó)板的(dí)正確結合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的結合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延伸是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則的。聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性，使反應中(zhōng)模板與(yǔ)引物的結合(復性)可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度(dù)下進(jìn)行，結(jié)合的特異(yì)性(xìng)大大(dà)增加，被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片段也就能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的(dí)正(zhèng)確度。再通過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異(yì)性(xìng)和(hé)保守性(xìng)高的靶基(jī)因區(qū)，其(qí)特(tè)異性程度就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成量是以指數(shù)方式(shì)增(zēng)加的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個靶(bǎ)細胞；在病(bìng)毒的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學(xué)中zui小檢出(chū)率為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次性(xìng)地將反應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後，即在DNA擴增液和水浴鍋上(shàng)進行變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應，一(yī)般在2～4 小時完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增產物(wù)一(yī)般(bān)用電泳分(fēn)析，不一定要用同(tóng)位素(sù)，無放射性(xìng)汙染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純(chún)度要(yào)求低(dī)
不需要分離病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可作(zuò)為擴增模板。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽液，毛發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
