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PCR檢測試劑盒
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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馬疥蟎(mǎn)PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Sarcoptes scabiei var(equi)PCR |
YS-P014727 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲存條件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效期(qī)：一(yī)年
貨期(qī)：現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有效期(qī)一般為1年，這(zhè)是指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分的(dí)試(shì)劑一(yī)般要貯存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部(bù)分試劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復凍融。
【結果分析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常陰性質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應為陽性，有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小於等於35；
3. 以上要(yào)求需(xū)在(zài)一次(cì)實(shí)驗中同(tóng)時(shí)滿足，否則(zé)該次實(shí)驗視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可(kě)疑樣本；對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復核(hé)一次，若(ruò)復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，則判(pàn)定為陽(yáng)性，否(fǒu)則(zé)判定為陰性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴增期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰性樣本。
【對檢驗結果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室環境汙染，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉汙染會出現(xiàn)假陽性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸(shū)，保(bǎo)存不當(dāng)或試劑配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下(xià)降，可能會(huì)導致(zhì)出現假陰(yīn)性結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性(xìng)：
②鹼基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應的忠實(shí)性(xìng)；
④靶基因(yīn)的特(tè)異性與保守(shǒu)性。
馬(mǎ)疥(jiè)蟎PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)其中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的正確(què)結(jié)合是(shì)關鍵。引物與模(mó)板的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈的延伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配對(duì)原則的(dí)。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的(dí)結合(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較高的溫(wēn)度下進(jìn)行，結合的特(tè)異性(xìng)大(dà)大(dà)增加(jiā)，被擴增的靶基因片段(duàn)也就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高的正確度。再通過選擇(zé)特(tè)異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性高的(dí)靶基因區，其(qí)特異性程度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物的(dí)生成量(liáng)是以指數方式(shì)增(zēng)加的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模板擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個靶細胞；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測(cè)中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次性地將反(fǎn)應(yīng)液(yè)加好後，即在DNA擴增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成(chéng)擴增反應。擴(kuò)增產物一(yī)般用電泳(yǒng)分析，不(bù)一定(dìng)要用同(tóng)位(wèi)素，無放射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度要(yào)求低(dī)
不(bù)需要(yào)分離病毒(dú)或細菌及培(péi)養細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可(kě)作為(wéi)擴增模板(bǎn)。可直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本(běn)如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔液，洗(xǐ)嗽液，毛發(fā)，細(xì)胞，活PCR技(jì)術(shù)概論。
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