產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑盒
| 產品(pǐn)名稱 | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號 |
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疥蟎(mǎn)通(tōng)用PCR檢測試(shì)劑(jì)盒 |
Sarcoptidae ssp.PCR |
YS-P014728 |
分(fēn)類:PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
儲存條(tiáo)件:-20℃避(bì)光保存(cún),避(bì)免反復凍融(róng)。
運輸:低溫(wēn),避(bì)光。
有效期:一年(nián)
貨期:現貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的有效(xiào)期一(yī)般為1年(nián),這(zhè)是(shì)指在適(shì)當的儲存溫度下。核酸擴增(zēng)部(bù)分的試劑(jì)一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下,產物檢測(cè)部(bù)分試劑(jì)則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
u 閾值(Threshold)設定:將閾值綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超(chāo)過正常陰性質控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的最高點(diǎn)。
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性,有(yǒu)明(míng)顯的指數擴(kuò)增期(qī),Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需(xū)在一(yī)次(cì)實驗(yàn)中同時(shí)滿(mǎn)足,否(fǒu)則該(gāi)次實驗視為無效(xiào)。
2.可疑(yí):有(yǒu)明顯的指數(shù)擴增(zēng)期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣本為(wéi)可疑樣(yàng)本(běn);對於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復(fù)核一次,若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增期(qī),則(zé)判(pàn)定為陽性(xìng),否則判(pàn)定為陰性(xìng);
3. 陰性:無指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī),Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環(huán)境(jìng)汙染,試劑汙染,樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結(jié)果;
2. 試劑(jì)運輸,保存不當或試(shì)劑(jì)配製不(bù)準確引起的(dí)試劑檢測效(xiào)能下(xià)降(jiàng),可(kě)能會導致出現假陰性結果。
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性;
④靶基因的特(tè)異(yì)性與保守性(xìng)。
疥(jiè)蟎通(tōng)用PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其中引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結合(hé)是關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與模板的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈的延(yán)伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé)的。聚合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫(wēn)性,使反應中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(復性(xìng))可以在較高的溫度(dù)下進行(háng),結(jié)合的特異性大大增(zēng)加,被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片(piàn)段也就能(néng)保(bǎo)持很高的正(zhèng)確度(dù)。再通(tōng)過選擇特(tè)異(yì)性和保(bǎo)守性高的(dí)靶(bǎ)基因區,其特異性程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成(chéng)量(liáng)是以指數(shù)方式增(zēng)加的(dí),能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個細胞中(zhōng)檢出一(yī)個靶細(xì)胞;在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢測(cè)中(zhōng),PCR的(dí)靈敏度(dù)可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單位);在細菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便,快(kuài)速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶(méi),一次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應液加好後,即在DNA擴(kuò)增液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行變性-退(tuì)火-延(yán)伸反(fǎn)應,一般(bān)在2~4 小(xiǎo)時完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用(yòng)電泳分(fēn)析(xī),不一(yī)定(dìng)要(yào)用同(tóng)位(wèi)素,無放(fàng)射(shè)性汙染(rǎn),易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純度要求(qiú)低
不(bù)需要分離(lí)病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細胞(bāo),DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可作為(wéi)擴增(zēng)模板。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如血(xiě)液,體(tǐ)腔液,洗嗽(sòu)液,毛(máo)發,細胞,活(huó)PCR技術概論(lùn)。
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