產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 英文名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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剛(gāng)地(dì)弓形蟲PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒 |
Toxophasma gondiiPCR |
YS-P014843 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
儲存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低溫(wēn)，避光。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為1年(nián)，這(zhè)是指在適當的儲存(cún)溫度下。核酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑一(yī)般(bān)要貯存於-20℃下，產(chǎn)物檢測部(bù)分試劑則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果分(fēn)析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值綫設(shè)定在剛好超過(guò)正常陰(yīn)性(xìng)質控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測結(jié)果應為(wéi)陽性，有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以上要求(qiú)需在(zài)一次實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否則(zé)該次(cì)實驗視為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯的指數(shù)擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑樣(yàng)本(běn)；對於可疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次，若復核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，則判定為陽(yáng)性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑汙(wū)染，樣(yàng)品交叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假陽性(xìng)結果；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或(huò)試劑(jì)配製不準確引起的試劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會導致出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結果。
PCR反應的特異(yì)性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠實(shí)性；
④靶基因的特(tè)異性與保守性(xìng)。
剛(gāng)地弓(gōng)形蟲PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的正確(què)結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物與模(mó)板的(dí)結(jié)合及(jí)引物鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫性(xìng)，使反應中模板(bǎn)與引物(wù)的(dí)結(jié)合(復(fù)性)可(kě)以在較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度下進行，結合的(dí)特異性(xìng)大大增(zēng)加，被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片段(duàn)也(yě)就能(néng)保持(chí)很高(gāo)的正確(què)度。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性(xìng)和保守性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基因區(qū)，其(qí)特異性(xìng)程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的(dí)生成量是(shì)以(yǐ)指數方式增加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶細胞；在病毒的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度可(kě)達3個RFU(空斑形成(chéng)單位)；在細菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反應用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一次(cì)性(xìng)地(dì)將反應(yīng)液(yè)加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴增液和水浴鍋上進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退火-延伸(shēn)反應，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一般用電泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一定要用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無(wú)放射(shè)性汙染(rǎn)，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純(chún)度(dù)要求低
不(bù)需(xū)要(yào)分離病毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可作為擴增模(mó)板。可(kě)直接用臨床標本(běn)如血(xiě)液，體腔液，洗嗽液，毛發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概論。
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