產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文名稱 | 貨號(hào) |
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耐萬古(gǔ)黴素腸(cháng)球菌PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
VancomycinResistant Enterococcus(VRE)PCR |
YS-P014897 |
分類：PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免反復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年
貨期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年，這是(shì)指在(zài)適當的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核酸擴(kuò)增部分的(dí)試(shì)劑(jì)一(yī)般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物檢測部分試劑則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超過正常陰性質(zhì)控品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為陽(yáng)性，有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct值應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需在一次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時滿足，否則該次實(shí)驗視為無效。
【結果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣本(běn)；對(duì)於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建議復(fù)核一(yī)次，若(ruò)復核結果Ct<40且有(yǒu)指數擴增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定為陽性，否(fǒu)則判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性樣本。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙染，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保存不(bù)當或試劑配(pèi)製不準(zhǔn)確引起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性。
耐萬古(gǔ)黴素腸球菌PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引(yǐn)物(wù)與模板的正確結合是關鍵(jiàn)。引物與模板的結合及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板與引(yǐn)物(wù)的結合(復(fù)性)可以(yǐ)在較高的溫(wēn)度下進行(háng)，結合的特異性大(dà)大增加，被擴增的靶基(jī)因片(piàn)段也(yě)就(jiù)能保持很高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再(zài)通過(guò)選擇(zé)特異性(xìng)和(hé)保守性高(gāo)的(dí)靶基因(yīn)區(qū)，其特異性(xìng)程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物的生成量是(shì)以指數方式(shì)增(zēng)加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始待測(cè)模板擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞中檢(jiǎn)出一個(gè)靶細胞；在(zài)病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位)；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出(chū)率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地將反應(yīng)液(yè)加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴增液(yè)和水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴增(zēng)產物一(yī)般用電泳(yǒng)分析，不一定(dìng)要用(yòng)同位素(sù)，無放射性汙染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的純度(dù)要求低(dī)
不需(xū)要分離(lí)病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴(kuò)增模(mó)板。可直接用臨(lín)床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞，活PCR技(jì)術概論(lùn)。
